بررسی اثر تیمار عصاره قارچ Ascochyta rabiei بر بیان موقت ژن گزارشگر GUS
کد مقاله : 1279-FIPPC (R1)
نویسندگان:
نرگس صادقی *1، مجتبی ممرآبادی2، فرهاد شکوهی فر3
1گروه گیاهپزشکی دانشکده کشاورزی دانشگاه فردوسی مشهد
2گروه گیاهپزشکی،دانشکده کشاورزی،دانشگاه فردوسی مشهد،ایران
3پژوهشکده علوم گیاهی دانشگاه فردوسی مشهد
چکیده مقاله:
بیان موقت مبتنی بر اگروباکتریوم به عنوان یک ابزار سریع وارزان قیمت می تواند در آنالیز توالی های تنظیمی و پروموتری مورد استفاده قرار گیرد. ارزیابی بیان یک توالی تنظیمی القائی در پاسخ به عامل محرک به کمک بیان موقت قابل آنالیز است. انتظار می رود در عصاره قارچ های بیمارگر تعدادی از مولکولها و پروتیئن ها حضور داشته باشند که قادر باشند علاوه بر القاء سیستم های دفاعی در گیاه، روی بیان پروتئین ها و احتمالا تجزیه آنها تاثیر داشته باشند. این مطالعه با هدف بررسی اثر عصاره قارچ بر میزان بیان ژن گزارشگر GUSتحت کنترل یک پروموتر دائمی در مقایسه با شرایط کنترل، انجام شد.تراریختی اگروباکتریوم سویه GV3101به ناقل pBI121با روش ذوب و انجماد انجام شد وتایید کلنی های تراریخت با روش کلنی PCR و با استفاده از آغازگرهای PSh3-F/Rانجام شد. تایید بیان پروکاریوتی ژن GUSبا قرار گرفتن سوسپانسیون باکتری حامل وکتور pBI121 در بافر هیستوشیمیایی GUS انجام شد در مرحله بعد بیان پروکاریوتی به همراه عصاره قارچ Ascochyta rabiei مورد تایید قرار گرفت. به منظور مقایسه بیان ناقلpBI121 در سلول های گیاه توتون در شرایط آلوده سازی توسط عصاره قارچ A. rabiei و48 ساعت بعد از تزریق اگروباکتریوم حامل وکتورpBI121 به برگ گیاهان توتون گونه های Nicotiana tabacum var. Xanthi و Nicotiana benthamiana، گیاهان با عصاره قارچ A. rabiei اسپری شدند و بعد از گذشت 24 ساعت بررسی بیان صورت گرفت. بیان ژن گزارشگر در شرایط تیمار عصاره قارچ و عدم تیمار بصورت کیفی سنجش شد. نتایج نشان می دهد بیان ناقل pBI121 تحت تاثیر غلظت های مختلف عصاره قارچ A. rabiei قرار نگرفته است. بر این اساس میتوان بررسی بیان ژن گزارشگر را در شرایط تیمار با عصاره قارچ مورد استفاده قرار داد. لذا این روش را می توان در مطالعات آنالیز بیان پروموترهای القاء شونده در شرایط تیمار با عصاره قارچ A. rabiei مورد استفاده قرار داد.
کلیدواژه ها:
کلمات کلیدی: بیان موقت، ژن گزارشگر GUS، ناقل pBI121، Ascochyta rabiei.
وضعیت : مقاله برای ارائه به صورت پوستر پذیرفته شده است